●目的蛋白有多个修饰位点(磷酸化位点、糖基化位点、乙酰化位点等),本身可以呈现多条带。查阅文献或进行生物信息学分析,获得蛋白序列的修饰位点信息,通过去修饰确定蛋白实际大小。 ●目的蛋白有其它剪切本查阅文献或生物信息学分析可能性。 ●样本处理过程中目的蛋白发生降解加入蛋白酶抑制剂;样本处理时在冰上操作。 ●上样量过高,太敏感 适当减少上样量。 ●一抗特异性不高重新选择或制备高特异性的抗体。 ●一抗不纯纯化抗体 <br/●一抗或者二抗浓度偏高降低抗体浓度。
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